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发布时间:2022-03-27 04:38:00 作者:立博泰业
RPA 的概念
概念:重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,反应温度在37°C左右。
即用型RPA检测试剂盒
客户采用RPA技术,可以根据自身需求开发自己的检测方法。在不同开发阶段所提供的这些即用型试剂盒内含有一整套用于检测主要食物病原体靶标的通用RPA试剂组分,灵活易用。
TwistDx公司曾经开发出系列即用型RPA检测试剂盒。例如,TwistAmp? exo +试剂盒为用户提供了一个exo试剂盒,加上用于实时荧光检测的引物探针及阳性模板,该模板可与每次检测反应配合使用。TwistGlow? 沙门氏菌(即用型,可用于实时荧光检测)和 TwistFlow? 沙门氏菌(即用型,可用于终点侧流检测)试剂盒均为用户提供包含靶基因及内部质控引物探针反应组分、一个两步走的细胞裂解样本制备方法,以及可与每次试剂盒反应配合使用的模板。
目前,TwistDx公司在被雅培收购后,停产了部分产品,包括:TwistAmp Basic RT试剂盒、TwistAmp exo RT试剂盒、TwistAmp Liquid Basic RT 试剂盒和TwistAmp Liquid exo RT试剂盒、食品安全试剂盒(包括TwistAmp exo 弯曲菌属检测试剂盒(TwistAmp exo +Campylobacter)、TwistAmp exo 单核细胞***李斯特菌检测试剂盒(TwistAmp exo +ListeriaM)、TwistGlow?沙门氏菌检测试剂盒(TwistGlow?Salmonella)和TwistFlow 沙门氏菌检测试剂盒(TwistFlow?Salmonella )共四种)。
TwistDx的未来
RPA核酸检测技术被誉为可替代PCR的犀利单分子检验技术,因为其灵敏,快速,对设备要求低,操作简易等特点。自其被开发出来之后,-直被广大科研工作者津津乐道。2009年,***较大种子公司孟山都与TwistDx公司合作进行***作物快速检测项目,旨在提高******作物移交转让效率。近年来TwistDx根据RPA检测特点, 通过在基础体系中填加不同酶和探针,开发出多款研发型和实用型检测产品,以实现多样化的RPA应用。
重组酶介导等温核酸扩增技术原理
RAA技术 是重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombinase Aided Amplification)的简称,是一种利用重组酶、单链结合蛋白、DNA聚合酶在等温条件下(佳温度37℃)进行核酸扩增的技术。具体原理为:重组酶、单链结合蛋白、引物形成复合体扫描双链DNA,在与引物同源的序列处使双链DNA解旋,单链结合蛋白(SSB)防止单链DNA复性,在能量和dNTP存在的情况下,由DNA聚合酶完成链的延伸,5-20分钟就可实现仪器扩增。
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