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PCR操作方法

这个方法很主流，也很经典。但是这个操作步骤太多，而且每次都是微量，手一抖就完蛋了。另外引物（就是拉链扣）的质量也是关键，如果错了拉链，那么整个检测前功尽弃。

当然还有机器清洗的问题，如果上一个阳性样本检测之后，没有洗干净设备，下一个本来阴性患者可能就会假阳性被误诊。中国大医院自己都有PCR检测仪器和人员，流程比较熟练。美国欧洲很多医院偏专科，综合性超大型少一些，本来很多检验都是委托外包第三方实验室。遇到疫情，着急出结果自己上手，可能有手法不纯熟的情况。如果又正好使用了某些中国的无证试剂盒厂商出品的无证试剂，多重误差叠加，准确度就会崩盘。

TwistDx试剂盒

体外核酸扩增（NAA），遗传物质的人工，已经渗透到生命科学和生物技术的所有领域，如病原体检测、研究、、测序、基因工程、合成生物学、基因分型、诱变、法医鉴定、发现、分子考古学、食品检测、健康和生活方式检测等。这场性革命始于 Kary Mullis 于 1983 年发明的聚合酶链反应 (PCR)。通过提供有利于核酸过程（链变性、引物退火和酶促延伸）的连续温度，在体外将单个核酸分子到数十亿个拷贝。

RPA 作为颠覆 PCR 的革命性方法的突出地位源于其特定的反应成分（表 1）和机制。 对于成功的 RPA 分析，细微差别取决于内在因素、引物、探针和核酸模板的设计； 并且与外在因素有关，如反应温度和搅拌、对错配的耐受性、和模板DNA。 此外，RPA 过程中的核酸标记、RPA 扩增子纯化和扩增后处理也是 RPA 检测成功的重要细节。 本节提供从 RPA 文献中总结的这些实用信息，作为 RPA 检测设计的指南。