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TwistDx试剂盒

先说结论:目前的检测仍重度依赖核酸检测(以PCR技术为主)，检测速度较慢(大  部分需要2小时以上)，成本较高，且需要经训练的医护或实验人员来操控设备，因此无法实  现大规模快速检测。其他已商业化的快速检测试剂盒绝大多数依靠检测(IgG/lgM),可在10-  20分钟内获取检测结果，成本较低，操作简单，但是准确性较差，有较大的概率出现假阳性与假阴  性的情况，因此仅适用于大量地区粗略统计人数以及比例，或作为核酸检测的辅助指  标，其检测结果无法作为确定检测者与否的决定性指标，而目前能实现快速检测(10-20分  钟)且确保准确性的方法之一抗原检测，尚未有成熟的产品面世，仅有少数科技公司宣称近完成了产品开发。此外，基于CRISPR的检测技术的试剂盒可以为认为是核酸检测技术与检测  技术的一个折中，准确性高，速度较快，成本较低且操作简单，但由于技术相对新  颖，只有少数公司与研究机构完成了试剂盒的开发，产品尚未大规模推广。

等温核酸扩增的新进展为人工核酸提供了简化的孵育条件，只需要恒温而不是热循环。单一温度培养降低了设备要求，开辟了突破实验室界限并在资源匮乏环境中进行扩增的新途径。通过减少扩增时间，消除重复的加热和冷却步骤还为低资源实施提供了第二个优势。更快的反应发生不仅因为加热和冷却时间的减少，而且因为多个分子反应可以异步进行，而不是在人工加热和冷却循环中顺序操作。自 1990 年代初以来，大量的等温核酸扩增方法采用了各种反应机制。

RPA 于 2006 年由 ASM Scientific Ltd（英国剑桥，由 Wellcome Trust Sanger Institute 创立）的 Niall Armes 推出。虽然RPA在等温核酸扩增技术中还没有占据很大的市场份额（根据Grand View Research报告的数据，图1A），但它正在经历着快速的发展。迄今为止，已经发表了 250 多篇有关 RPA 的出版物，并且在过去六年中 RPA 的文献数量一直在增加；值得注意的是，RPA 文献数量从 2014 年开始呈指数增长。

RPA 作为颠覆 PCR 的革命性方法的突出地位源于其特定的反应成分（表 1）和机制。 对于成功的 RPA 分析，细微差别取决于内在因素、引物、探针和核酸模板的设计； 并且与外在因素有关，如反应温度和搅拌、对错配的耐受性、和模板DNA。 此外，RPA 过程中的核酸标记、RPA 扩增子纯化和扩增后处理也是 RPA 检测成功的重要细节。 本节提供从 RPA 文献中总结的这些实用信息，作为 RPA 检测设计的指南。