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TwistDx恒温扩增应用

TwistDx公司开发的重组酶聚合酶扩增（RPA），被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp 核酸扩增产品，能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。

RPA反应的适宜温度在37℃~42℃之间，无需变性，常温下即可反应，大大加快了PCR的速度。并且由于不需要温控设备，RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。RPA检测的灵敏度很高，能够将痕量的核酸（尤其是DNA）模板扩增到可检出水平，从单个模板分子得到大约1012扩增产物。无需复杂样品处理，即可实地检测；既可扩增DNA也可扩增RNA，省去额外的cDNA合成步骤；检测方式多样：终点检测、对扩增过程进行实时监控或通过侧流层析试纸条（LFD）读取结果。

试剂盒包括两类：①.TwistAmp冻干研发试剂盒（包括TwistAmp Basic试剂盒、TwistAmp exo 试剂盒和TwistAmp nfo 试剂盒共三种）；②. TwistAmp液态研发试剂盒（包括TwistAmp Liquid Basic 试剂盒和TwistAmp Liquid exo 试剂盒共两种）

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即用型RPA检测试剂盒

客户采用RPA技术，可以根据自身需求开发自己的检测方法。在不同开发阶段所提供的这些即用型试剂盒内含有一整套用于检测主要食物病原体靶标的通用RPA试剂组分，灵活易用。

TwistDx公司曾经开发出系列即用型RPA检测试剂盒。例如，TwistAmp? exo +试剂盒为用户提供了一个exo试剂盒，加上用于实时荧光检测的引物探针及阳性模板，该模板可与每次检测反应配合使用。TwistGlow? 沙门氏菌（即用型，可用于实时荧光检测）和 TwistFlow? 沙门氏菌（即用型，可用于终点侧流检测）试剂盒均为用户提供包含靶基因及内部质控引物探针反应组分、一个两步走的细胞裂解样本制备方法，以及可与每次试剂盒反应配合使用的模板。

目前，TwistDx公司在被雅培收购后，停产了部分产品，包括：TwistAmp Basic RT试剂盒、TwistAmp exo RT试剂盒、TwistAmp Liquid Basic RT 试剂盒和TwistAmp Liquid exo RT试剂盒、食品安全试剂盒（包括TwistAmp exo 弯曲菌属检测试剂盒（TwistAmp exo +Campylobacter）、TwistAmp exo 单核细胞***李斯特菌检测试剂盒（TwistAmp exo +ListeriaM）、TwistGlow?沙门氏菌检测试剂盒（TwistGlow?Salmonella）和TwistFlow 沙门氏菌检测试剂盒（TwistFlow?Salmonella ）共四种）。

TwistDx试剂盒

目前常见的检测有核酸检测和检测。前者通过扩增患者样本中的病毒核酸，直接判定病毒的存在与否。而后者则是通过的存在，来间接推断出是否病毒。所以从检测的性质来看，就已不难理解其准确性会大大低于核酸检测。特别对于还没来得及形成的早期者以及刚刚康复的患者而言，检测的结果一般都不太可靠。因此，检测并不能用于诊断新冠，主要用于协助临床诊断。

DNA检测的原理是聚合酶链式反应（PCR）。如果你了病毒，那么应该能检测到病毒的核酸，我们可以利用体外DNA扩增的方式扩增这些核酸并检测。PCR就是一种体外DNA扩增的技术，简单来说就是可以让特定的DNA分子一条链变两条链，两条变四条，四条变八条，每个循环翻一倍。然后通过看经过多少个循环这个DNA分子的数量超过阈值，就可以计算原本样品中DNA的量（也就是说每少一个循环超过阈值说明病毒核酸的量多一倍）。一个30循环的PCR反应大概需要两小时。算上样品处理等时间应该会在四到五个小时左右，如果要等其他人一起做则更久。