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发布时间:2022-04-23 02:38:00 作者:立博泰业
RPA技术犀利在何处
常规PCR必须经过变性、退火、延伸三个步骤,而PCR仪本质上就是一个控制温度升降的设备。RPA反应的温度在37°C - 42°C之间,无需变性,在常温下即可进行。这无疑能大大加快PCR的速度。此外,由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。
据介绍,RPA检测的灵敏度很高,能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可以检出的水平,从单个模板分子得到大约1012扩增产物。而且RPA还用不着复杂的样品处理,适用于无法提取核酸的实地检测。
即用型RPA检测试剂盒
客户采用RPA技术,可以根据自身需求开发自己的检测方法。在不同开发阶段所提供的这些即用型试剂盒内含有一整套用于检测主要食物病原体靶标的通用RPA试剂组分,灵活易用。
TwistDx公司曾经开发出系列即用型RPA检测试剂盒。例如,TwistAmp? exo +试剂盒为用户提供了一个exo试剂盒,加上用于实时荧光检测的引物探针及阳性模板,该模板可与每次检测反应配合使用。TwistGlow? 沙门氏菌(即用型,可用于实时荧光检测)和 TwistFlow? 沙门氏菌(即用型,可用于终点侧流检测)试剂盒均为用户提供包含靶基因及内部质控引物探针反应组分、一个两步走的细胞裂解样本制备方法,以及可与每次试剂盒反应配合使用的模板。
目前,TwistDx公司在被雅培收购后,停产了部分产品,包括:TwistAmp Basic RT试剂盒、TwistAmp exo RT试剂盒、TwistAmp Liquid Basic RT 试剂盒和TwistAmp Liquid exo RT试剂盒、食品安全试剂盒(包括TwistAmp exo 弯曲菌属检测试剂盒(TwistAmp exo +Campylobacter)、TwistAmp exo 单核细胞李斯特菌检测试剂盒(TwistAmp exo +ListeriaM)、TwistGlow?沙门氏菌检测试剂盒(TwistGlow?Salmonella)和TwistFlow 沙门氏菌检测试剂盒(TwistFlow?Salmonella )共四种)。
TwistDx试剂盒
先说结论:目前的检测仍重度依赖核酸检测(以PCR技术为主),检测速度较慢(大 部分需要2小时以上),成本较高,且需要经训练的医护或实验人员来操控设备,因此无法实 现大规模快速检测。其他已商业化的快速检测试剂盒绝大多数依靠检测(IgG/lgM),可在10- 20分钟内获取检测结果,成本较低,操作简单,但是准确性较差,有较大的概率出现假阳性与假阴 性的情况,因此仅适用于大量地区粗略统计人数以及比例,或作为核酸检测的辅助指 标,其检测结果无法作为确定检测者与否的决定性指标,而目前能实现快速检测(10-20分 钟)且确保准确性的方法之一抗原检测,尚未有成熟的产品面世,仅有少数科技公司宣称近完成了产品开发。此外,基于CRISPR的检测技术的试剂盒可以为认为是核酸检测技术与检测 技术的一个折中,准确性高,速度较快,成本较低且操作简单,但由于技术相对新 颖,只有少数公司与研究机构完成了试剂盒的开发,产品尚未大规模推广。
TwistDx试剂盒的相关介绍
自 1990 年代初以来,大量的等温核酸扩增方法采用了各种反应机制。成熟的方法是基于核酸序列的扩增(NASBA,也称为转录介导的扩增,TMA)、核糖核酸(RNA)技术的信号介导扩增(SMART)、解旋酶依赖性扩增(HDA) 、重组酶聚合酶扩增(RPA)、滚环扩增(RCA)、多重置换扩增(MDA)、环介导等温扩增(LAMP)和链置换扩增(SDA);
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