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进口TwistDx试剂盒代理商询问报价「立博泰业」

发布时间:2022-08-22 22:07:00        作者:立博泰业







TwistDx相关问题

1. RPA能实现多重化吗?

可以。RPA技术支持在同一个管中同时进行多个扩增反应。不过,多重化的引物组合需要精心设计,以便每个引物都能同样有效的工作。需要注意的是,RPA反应的引物总量(nmol)尽量不要超标太多。如果在-一个反应中使用两个以上的扩增引物,就应该控制不同引物的量。另外,我们应当事先考虑好检测多个扩增事件的探针、设备以及荧光团的兼容性。

2.能否对模板进行定量?

可以。扩增子达到可检出水平的时间,依赖于反应起始时的模板量。初始模板的拷贝越多,扩增子就越快达到可检出水平。不过,这种定量需要精心的实验安排,确保对照反应是同时开始的。举例来说,可以利用镁离子的添加时间进行控制。因为镁离子一一旦进入体系,RPA反应就会开始。此外,较慢的扩增过程有助于更***的定量。我们可以通过调整反应条件或引物设计来减慢RPA的反应速度。

3能否进行荧光终点分析?

可以。这样比较的是反应开始时的荧光和反应结束时的荧光,荧光增强意味着发生了扩增。

4能否支持生物素或荧光标记的寡核苷酸?

支持。在RPA反应中,连有生物素或荧光团的引物与未修饰的引物表现差不多。据悉还没有发现任何差异。

5跑胶前需要回收RPA产物吗?

需要。RPA反应中的物质会干扰琼脂糖电泳,如果不进行产物回收,跑出来的带会出现拖尾。






恒温扩增技术

应用领域:广泛应用于临床诊断,食品安全检测,动物疾病检测等领域

技术特点:快速,特异,无需专门设备

类型:取代PCR的恒温核酸扩增技术,目前有应用前景的就是RPA技术,此外也有一些其他恒温扩增技术,主要包括:

1. 滚环核酸扩增( rolling circle amolification,RCA )

2.环介导等温扩增( loop-mediated isothermal amplification,LAMP)

3.链替代扩增

4.依赖核酸序列扩增( nucleicacid sequence based amplification ,NASBA)

5.解链酶扩增( helix dependent amplification, HAD)





TwistDx试剂盒

先说结论:目前的检测仍重度依赖核酸检测(以PCR技术为主),检测速度较慢(大  部分需要2小时以上),成本较高,且需要经训练的医护或实验人员来操控设备,因此无法实  现大规模快速检测。其他已商业化的快速检测试剂盒绝大多数依靠检测(IgG/lgM),可在10-  20分钟内获取检测结果,成本较低,操作简单,但是准确性较差,有较大的概率出现假阳性与假阴  性的情况,因此仅适用于大量地区粗略统计人数以及比例,或作为核酸检测的辅助指  标,其检测结果无法作为确定检测者与否的决定性指标,而目前能实现快速检测(10-20分  钟)且确保准确性的方法之一抗原检测,尚未有成熟的产品面世,仅有少数科技公司宣称近完成了产品开发。此外,基于CRISPR的检测技术的试剂盒可以为认为是核酸检测技术与检测  技术的一个折中,准确性高,速度较快,成本较低且操作简单,但由于技术相对新  颖,只有少数公司与研究机构完成了试剂盒的开发,产品尚未大规模推广。



至关重要的是,RPA 的技术增强了实验室外高度可访问和灵敏的核酸扩增,甚至是自我测试。在这里,我们回顾了 RPA 在其个十年发展过程中的无需设备的简单性。我们的综述包括 RPA 技术的关键知识,例如其反应成分、机制、灵敏度和特异性以及的检测方法。该综述还提供了开发 RPA 分析的专有技术,以及有关市售 RPA 反应试剂盒和附件的信息。







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