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发布时间:2022-08-28 03:56:00 作者:立博泰业
TwistDx恒温扩增应用
TwistDx公司开发的重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。
RPA反应的适宜温度在37℃~42℃之间,无需变性,常温下即可反应,大大加快了PCR的速度。并且由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。RPA检测的灵敏度很高,能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可检出水平,从单个模板分子得到大约1012扩增产物。无需复杂样品处理,即可实地检测;既可扩增DNA也可扩增RNA,省去额外的cDNA合成步骤;检测方式多样:终点检测、对扩增过程进行实时监控或通过侧流层析试纸条(LFD)读取结果。
试剂盒包括两类:①.TwistAmp冻干研发试剂盒(包括TwistAmp Basic试剂盒、TwistAmp exo 试剂盒和TwistAmp nfo 试剂盒共三种);②. TwistAmp液态研发试剂盒(包括TwistAmp Liquid Basic 试剂盒和TwistAmp Liquid exo 试剂盒共两种)
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重组酶介导等温核酸扩增技术原理
RAA技术 是重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombinase Aided Amplification)的简称,是一种利用重组酶、单链结合蛋白、DNA聚合酶在等温条件下(佳温度37℃)进行核酸扩增的技术。具体原理为:重组酶、单链结合蛋白、引物形成复合体扫描双链DNA,在与引物同源的序列处使双链DNA解旋,单链结合蛋白(SSB)防止单链DNA复性,在能量和dNTP存在的情况下,由DNA聚合酶完成链的延伸,5-20分钟就可实现仪器扩增。
TwistDx试剂盒的介绍
等温核酸扩增的新进展为人工核酸提供了简化的孵育条件,只需要恒温而不是热循环。单一温度培养降低了设备要求,开辟了突破实验室界限并在资源匮乏环境中进行扩增的新途径。通过减少扩增时间,消除重复的加热和冷却步骤还为低资源实施提供了第二个优势。更快的反应发生不仅因为加热和冷却时间的减少,而且因为多个分子反应可以异步进行,而不是在人工加热和冷却循环中顺序操作。自 1990 年代初以来,大量的等温核酸扩增方法采用了各种反应机制。
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