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发布时间:2021-04-19 07:29:00 作者:立博泰业
自主研发用时,引物设计需注意!
核酸试纸条三明治夹心检验法探针设计:在上下游引物中间设计一条长度为46-52nt与目的片段互补序列;5’端修饰一个抗原标记(典型FAM);5’端和3’端中间位置标记一个dSpacer(THF);3’端标记一个修饰基团,如胺基、生物素或C3-Spacer,同时要求下游引物5’端标记一个修饰基团。
该方法极其适用于现场核酸检测。可应用于初筛、食品安全、宠物疾病检测等各种不具备完整分子检测条件下的核酸测试。对操作人员***水平要求低,检测结果可信度高。
安普未来的解决方案操作十分简单
1核酸提取
直接取咽拭子等样品放入管A中(含裂解液,可灭活病毒);
管A放入95℃-100℃水浴或者金属浴10分钟;2扩增反应
向含有冻干试剂(冻干试剂包含了生物酶与各反应组分;可常温运输,便捷)的反应管中加入42.5 μL R buffer使其复溶;
取核酸提取步骤中提取完成的样本3-5μL 加入反应管;
然后在反应管加入2.5μL启动B buffer,盖上盖充分混匀后上机反应。反应温度为42℃,时长20min,实时显示荧光扩增曲线。其结果分析与荧光定量PCR类似,简单易懂。
多酶恒温快速扩增技术具有以下特点
1、检测精度更高,本技术检测目标为核酸,灵敏度可以达到10个拷贝的数量级;2、“小、快、非***操作”,本技术对应的仪器其小而便捷,对操作技能要求不高,检测时间短(5-15分钟可判定检测样本的阴阳性),可广泛用于野外、兽医站、养殖基地等场景。3、果判读的方式也多种多样:凝胶电泳型、荧光定量型和胶体金试纸条型。本技术能够实现在动物疫病检测领域中即时检测的要求,满足了养殖业转型升级对现代兽医服务的迫切需求,为动物疫病防控工作以及现代养殖业的可持续发展保驾护航。
同时,安普未来也提供可自主开发的科研类试剂,通过指导使用者自行设计引物与探针,从而令广大用户均可实现自主开发分子快速检测试剂,实现20分钟内完成核酸扩增、判读结果。
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