核酸释放价格服务为先「多图」

2019-noCov检测再提速！山师大研发出20分钟检测试剂盒

     新型冠状病毒疫情爆发之后，山东师范大学生命学院“动物创新研究团队”成员心系疫情，在省科技厅“新型冠状病毒被染上的疫情应急技术攻关及集成应用”重大科技创新工程的支持下，同心协力，争分夺秒进行技术攻关，联合山东莱博生物科技有限公司和潍坊安普未来生物科技有限公司共同研发出新型的快速核酸检测试剂盒，目前该试剂盒已经进入国家食品药品监督管理局审查程序。

恒温快速扩增试剂盒的操作简单

首先：核酸提取

1. 取样放入管A中; （管A中核酸释放液，能灭活病毒）

2. 管A放入95℃-100℃10分钟（原理是核酸释放液中酶失活，但是能进一步灭活病毒）；

第二步：扩增反应

3. 直接向管中的干粉试剂加如buffer 1使其变成液态；

4. 向8连管管盖上滴上buferr 2（高粘度不会轻易脱落）以备用。

5. 取管A中液体5ul加入8连管内。后盖盖。之后直接上机即可。20min后机器实时显示结果。

注：可采用我司的荧光检测设备。WL-1601（16孔荧光检测仪）

亦可采用市面上咋销售的各类荧光定量qPCR仪。均可实现20min内完成检测的效果。

其结果分析跟荧光定量PCR基本相同，亦有实施荧光S型曲线，简单易懂。

我司不仅针对自己的设备配有详细的操作说明，针对其他品牌的设备也匹配了相应的条件设置SOP或短视频，以便客户拿到试剂产品后，可在几分钟内掌握检测方法。

（荧光定量PCR检测结果）

（安普未来荧光检测仪结果）

使用该技术方案，如果3名检测人员同时工作，一天8个小时可完成1400份以上的样本检测。大幅提升检测效率，且对检测环境以及设备要求不高。

恒温快速扩增试剂盒原理概述

本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩 增技术:在常温恒温条件下，重组酶和引物形成蛋白单链核苷酸的复合体Rec/ssDNA,在辅助蛋白和单链结合蛋白SSB的帮助下，侵入双链DNA模板，在侵入位点形成D-loop区域，并开始对DNA双链进行扫描;待找到与引|物互补的目的区域后,复合体Rec/ssDNA解体的同时，聚合酶也结合到引|物的3'末端，开始链的延伸。本试剂盒在39。C下，依赖核酸外切酶的作用，加入根据模版设计的特异的分子探针，使用荧光监测设备能实现对目标片段扩增过程的实时监控。

恒温快速扩增试剂盒操作步骤

提前30分钟将试剂盒所需组分取出，室温融化，震荡混匀。

1)    每个干粉反应管加入29.4 μL A buffer（注意：A buffer需完全融化混匀，否则会对实验效果产生影响）；

2)    每个反应管分别加入2 μL上游引物、2 μL下游引物和0.6 μL探针（引物和探针浓度为10 μM，对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中）；

3)    向反应管中依次加入11.5 μL ddH2O和2 μL核酸模板（可根据核酸浓度调整加入的核酸模板体积，并相应调整加入的ddH2O体积，至模板与ddH2O总体积为13.5 μL）；

4)    然后向反应管中加入2.5 μL B buffer并充分混合（对于多个反应，建议将B buffer加至反应管的盖子内侧，上下颠倒反应管8-10次混匀）；

5)    混匀后，将反应液甩（或快速离心）至管子底部，然后立即将反应管放入恒温设备中37-39 oC孵育8-12 mins；

6)    反应结束后，取10 μL加入含有190 μL ddH2O的离心管中，混合均匀后，将胶体金试纸条的样品端插入离心管中平衡，5 mins内观察质控线与检测线判读结果。