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发布时间:2021-11-18 17:01:00 作者:立博泰业
突破传统桎梏,将分子检测带入一个新领域
具体操作方法如下:
1. 采用我司自主开发的快速核酸释放剂提取核酸(核酸释放剂与样本混匀,室温静置5分钟即可取上清作为核酸模板),或者采用市场常见“离心柱法”和“磁珠法”提取核酸作为模板亦可;
2. 取上述模板2μL加入到复融后的反应液中,通过上述各种加热手段,保证加热温度在37°~42°之间10分钟即可。
3. 上述反应时间结束后,向反应液中加入少许无菌水稀释,后直接插入试纸条,则马上可通过试纸条上的条带颜色变化,从而判定阴阳性。
自主研发用时,引物设计注意事项:
核酸试纸条三明治夹心检验法探针设计:在上下游引物中间设计一条长度为46-52nt与目的片段互补序列;5’端修饰一个抗原标记(典型FAM);5’端和3’端中间位置标记一个dSpacer(THF);3’端标记一个修饰基团,如胺基、生物素或C3-Spacer,同时要求下游引物5’端标记一个修饰基团。
安普未来的解决方案操作十分简单
1核酸提取
直接取咽拭子等样品放入管A中(含裂解液,可灭活病毒);
管A放入95℃-100℃水浴或者金属浴10分钟;2扩增反应
向含有冻干试剂(冻干试剂包含了生物酶与各反应组分;可常温运输,便捷)的反应管中加入42.5 μL R buffer使其复溶;
取核酸提取步骤中提取完成的样本3-5μL 加入反应管;
然后在反应管加入2.5μL启动B buffer,盖上盖充分混匀后上机反应。反应温度为42℃,时长20min,实时显示荧光扩增曲线。其结果分析与荧光定量PCR类似,简单易懂。
大动物快速分子检测综合解决方案
———MIRA分子检测技术的应用
随着2018年底席卷***的非洲疫情的爆发,国家对大型养殖&屠宰企业,乃至整个食品供应链的安全生产日趋重视,规范也越来越严格。同时,随着农业有关部门正式下文要求务必采取PCR检测方法进行生猪的非洲健康检验。核酸检测&PCR技术也正式进入畜牧养殖企业的质量监管体系中。但是,PCR分子检测技术一直以来都是科研系统的***技术,对操作人员、操作环境以及操作成本都有很高的要求,这也是其一直以来在科研(如兽研所)以外非***领域难以推广开来的原因。
什么样的分子检测技术才是高***的,且又能怎样帮到畜牧养殖企业呢?
“首先”分子检测的很大优势是可以将动物病害的预防大幅度提前。现在较为普及的检测法,是在牲口已有较为明显的发病征兆时,利用其本身产生的蛋白才能检测出来。所以属于中晚期预防技术。而,分子扩增技术是将潜伏在牲口体内或周边的微量病毒,在体外进行繁殖扩增,进而直接检测病毒本身。因此属于早中期检测技术。
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