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RPA原理

重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物，能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就会发生链交换反应形成并启动DNA合成，对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合，防止进一步替换。在这个体系中，由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快，一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。

PCR操作方法

这个方法很主流，也很经典。但是这个操作步骤太多，而且每次都是微量，手一抖就完蛋了。另外引物（就是拉链扣）的质量也是关键，如果错了拉链，那么整个检测前功尽弃。

当然还有机器清洗的问题，如果上一个阳性样本检测之后，没有洗干净设备，下一个本来阴性患者可能就会假阳性被误诊。中国大医院自己都有PCR检测仪器和人员，流程比较熟练。美国欧洲很多医院偏专科，综合性超大型少一些，本来很多检验都是委托外包第三方实验室。遇到疫情，着急出结果自己上手，可能有手法不纯熟的情况。如果又正好使用了某些中国的无证试剂盒厂商出品的无证试剂，多重误差叠加，准确度就会崩盘。

TwistDx试剂盒

增加分子数量使核酸的处理和后续应用更容易，减少了使用有毒性探针来跟踪分子存在的需求，并在应用方面产生了巨大的创造力。然而，尽管PCR很有价值 ，但是其需要复杂的热循环仪来提供循环加热和冷却过程，这在很大程度上限制了 PCR 在实验室内的实现，阻碍了其在资源匮乏环境中的应用。

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RPA 于 2006 年由 ASM Scientific Ltd（英国剑桥，由 Wellcome Trust Sanger Institute 创立）的 Niall Armes 推出。虽然RPA在等温核酸扩增技术中还没有占据很大的市场份额（根据Grand View Research报告的数据，图1A），但它正在经历着快速的发展。迄今为止，已经发表了 250 多篇有关 RPA 的出版物，并且在过去六年中 RPA 的文献数量一直在增加；值得注意的是，RPA 文献数量从 2014 年开始呈指数增长。