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发布时间:2022-01-18 07:27:00 作者:立博泰业
安普未来试剂盒
核酸杂交是病原微生物中具有互补序列的核苷酸单链在细胞内融合形成异质双链的过程,导致发生杂交的因素是核酸与探针发生化学反应,从而对病原微生物进行鉴定。目前用于对病原微生物进行检测的核酸再交技术主要有核酸原位杂交和膜上印迹杂交。核酸原位杂交是指病原体细胞中的核酸与标记探针进行杂交。膜上印迹杂交是指实验人员将病原体细胞的核酸分离出后,将其进行纯化后与固相支持物相结合,然后与核算探针进行杂交。
① 提取病毒的RNA
先从样本中提取出病毒的RNA。具体来说,就是在样本中加入核酸提取试剂,把病毒破坏,让核酸释放出来。
② 把病毒RNA“反转录”成cDNA
通过反转录技术(RT),把病毒的RNA“反转”成一种特异DNA,即cDNA(因为病毒RNA结构不稳定,所以把病毒RNA转换成稳定的cDNA会更方便检测)
这里会用到核酸检测试剂盒中一种叫“反转录酶”的物质。而完成转录后,所有工作都将围绕cDNA展开。
③ 进行cDNA的扩增与检测
简单说就是扩增cDNA的数量。这里应用的就是PCR,全称聚合酶链式反应。具体来说,就是借助试剂盒中一些特殊物质,让cDNA不断,使其数量呈指数式增长。
核酸检测技术是基于核酸双链互补配对原则的核酸杂交技术,技术人员合成一段与特定病原体 DNA 或者 RNA 互补的单链核酸序列作为探针,并用生物素、性同位素、酶等进行标记,让其与待测病原体的核酸进行杂交。
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