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发布时间：2022-02-13 05:03:00 作者：立博泰业
自主研发用时，引物设计需注意！
核酸试纸条三明治夹心检验法探针设计：在上下游引物中间设计一条长度为46-52nt与目的片段互补序列；5’端修饰一个抗原标记（典型FAM）;5’端和3’端中间位置标记一个dSpacer(THF)；3’端标记一个修饰基团，如胺基、生物素或C3-Spacer，同时要求下游引物5’端标记一个修饰基团。
该方法极其适用于现场核酸检测。可应用于初筛、食品安全、宠物疾病检测等各种不具备完整分子检测条件下的核酸测试。对操作人员***水平要求低，检测结果可信度高。
安普未来的解决方案操作十分简单
1核酸提取
直接取咽拭子等样品放入管A中（含裂解液，可灭活病毒）；
管A放入95℃-100℃水浴或者金属浴10分钟；2扩增反应
向含有冻干试剂（冻干试剂包含了生物酶与各反应组分；可常温运输，便捷）的反应管中加入42.5 μL R buffer使其复溶；
取核酸提取步骤中提取完成的样本3-5μL 加入反应管；
然后在反应管加入2.5μL启动B buffer，盖上盖充分混匀后上机反应。反应温度为42℃，时长20min，实时显示荧光扩增曲线。其结果分析与荧光定量PCR类似，简单易懂。
安普未来试剂盒
探针序列不与特异性引物识别位点重叠，长度为46-52nt，序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。 探针共有四个修饰位点:距离5’端的235nt的中部位置标记一个dSpacer(四氢，THF)，作为核酸外切酶的识 别位点;THF位点的上游标记一个荧光基团，下游标记一个粹灭基团，两个基团的间距为2-4nt;THF距离3”末端215 nt，并且3’末端标记一个修饰基团，例如胺基、磷酸基团或C3-Spacer.
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