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发布时间:2022-03-10 13:15:00 作者:立博泰业
2019-noCov检测再提速!山师大研发出20分钟检测试剂盒
新型冠状病毒疫情爆发之后,山东师范大学生命学院“动物创新研究团队”成员心系疫情,在省科技厅“新型冠状病毒被染上的疫情应急技术攻关及集成应用”重大科技创新工程的支持下,同心协力,争分夺秒进行技术攻关,联合山东莱博生物科技有限公司和潍坊安普未来生物科技有限公司共同研发出新型的快速核酸检测试剂盒,目前该试剂盒已经进入国家食品药品监督管理局审查程序。
安普未来的解决方案操作十分简单
1核酸提取
直接取咽拭子等样品放入管A中(含裂解液,可灭活病毒);
管A放入95℃-100℃水浴或者金属浴10分钟;2扩增反应
向含有冻干试剂(冻干试剂包含了生物酶与各反应组分;可常温运输,便捷)的反应管中加入42.5 μL R buffer使其复溶;
取核酸提取步骤中提取完成的样本3-5μL 加入反应管;
然后在反应管加入2.5μL启动B buffer,盖上盖充分混匀后上机反应。反应温度为42℃,时长20min,实时显示荧光扩增曲线。其结果分析与荧光定量PCR类似,简单易懂。
恒温快速扩增试剂盒操作步骤
提前30分钟将试剂盒所需组分取出,室温融化,震荡混匀。
1) 每个干粉反应管加入29.4 μL A buffer(注意:A buffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产生影响);
2) 每个反应管分别加入2 μL上游引物、2 μL下游引物和0.6 μL探针(引物和探针浓度为10 μM,对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中);
3) 向反应管中依次加入11.5 μL ddH2O和2 μL核酸模板(可根据核酸浓度调整加入的核酸模板体积,并相应调整加入的ddH2O体积,至模板与ddH2O总体积为13.5 μL);
4) 然后向反应管中加入2.5 μL B buffer并充分混合(对于多个反应,建议将B buffer加至反应管的盖子内侧,上下颠倒反应管8-10次混匀);
5) 混匀后,将反应液甩(或快速离心)至管子底部,然后立即将反应管放入恒温设备中37-39 oC孵育8-12 mins;
6) 反应结束后,取10 μL加入含有190 μL ddH2O的离心管中,混合均匀后,将胶体金试纸条的样品端插入离心管中平衡,5 mins内观察质控线与检测线判读结果。
安普未来试剂盒
国内呼吸道病原体检测的热度逐渐升温,主要原因为国内疫情爆发初期样症状患者混入新冠者,很难通过临床症状予以区分,所以当时发布的《新型冠状病毒诊疗方案(试行第八版)》就指出:新型冠状病毒主要与病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒等其他已知病毒性及支原体鉴别,尤其是对疑似病例要尽可能采取包括快速抗原检测和多重PCR核酸检测等方法,对常见呼吸道病原体进行检测。
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