TwistAmp Liquid exo公司择优推荐「在线咨询

PCR革新技术-英国TwistDx Inc公司开发恒温扩增RPA

英国TwistDx Inc公司开发的重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)--被称为是可以替代PCR的核酸检测技术，目前***新的等温扩增检测技术。以此为基础的TwistAmp? 核酸扩增产品，能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。该技术对硬件设备的要求很低，特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物防御和农业等领域。

常规PCR必须经过变性、退火、延伸三个步骤，而PCR仪本质上就是一个控制温度升降的设备。RPA反应的适宜温度在37°C - 42°C之间，无需变性，在常温下即可进行。这无疑能大大加快PCR的速度。此外，由于不需要温控设备，RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。

据介绍，RPA检测的灵敏度很高，能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可以检出的水平，从单个模板分子得到大约1012扩增产物。而且RPA还用不着复杂的样品处理，适用于无法提取核酸的实地检测。

RPA不仅可以对扩增产物进行终点检测，还可以对扩增过程进行实时监控，甚至可以通过试纸条(侧流层析试纸条LFD)读取结果。

目前，TwistAmp? 试剂盒的扩增子长度在500bp以内。不过，经过特别优化的RPA扩增，也可以生成更长的扩增产物，或者减慢扩增速度(便于定量)，甚至在更低的温度下进行反应。

TwistDx试剂盒

先说结论:目前的检测仍重度依赖核酸检测(以PCR技术为主)，检测速度较慢(大  部分需要2小时以上)，成本较高，且需要经训练的医护或实验人员来操控设备，因此无法实  现大规模快速检测。其他已商业化的快速检测试剂盒绝大多数依靠检测(IgG/lgM),可在10-  20分钟内获取检测结果，成本较低，操作简单，但是准确性较差，有较大的概率出现假阳性与假阴  性的情况，因此仅适用于大量地区粗略统计人数以及比例，或作为核酸检测的辅助指  标，其检测结果无法作为确定检测者与否的决定性指标，而目前能实现快速检测(10-20分  钟)且确保准确性的方法之一抗原检测，尚未有成熟的产品面世，仅有少数科技公司宣称近完成了产品开发。此外，基于CRISPR的检测技术的试剂盒可以为认为是核酸检测技术与检测  技术的一个折中，准确性高，速度较快，成本较低且操作简单，但由于技术相对新  颖，只有少数公司与研究机构完成了试剂盒的开发，产品尚未大规模推广。

我们通过对已发表文献的数据挖掘总结了关键的 RPA 实验技巧和问题，以帮助研究人员掌握 RPA 反应。我们还概述了 RPA 发展的有影响力的热点，并总结了对未来发展的展望以及对超过PCR和进一步革新生命科学的影响。

 立博泰业——专注研究、销售TwistDx试剂盒产品，我们公司坚持用户为上帝，想用户之所想，急用户之所急，以诚为本，讲求信誉，以产品求发展，以质量求生存，我们热诚地欢迎各位同仁合作共创辉煌。

RPA 于 2006 年由 ASM Scientific Ltd（英国剑桥，由 Wellcome Trust Sanger Institute 创立）的 Niall Armes 推出。虽然RPA在等温核酸扩增技术中还没有占据很大的市场份额（根据Grand View Research报告的数据，图1A），但它正在经历着快速的发展。迄今为止，已经发表了 250 多篇有关 RPA 的出版物，并且在过去六年中 RPA 的文献数量一直在增加；值得注意的是，RPA 文献数量从 2014 年开始呈指数增长。