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RPA 的概念

概念：重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)，被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶：能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性，反应温度在37°C左右。

恒温扩增技术

应用领域:广泛应用于临床诊断，食品安全检测，动物疾病检测等领域

技术特点:快速，特异，无需专门设备

类型:取代PCR的恒温核酸扩增技术，目前有应用前景的就是RPA技术，此外也有一些其他恒温扩增技术，主要包括：

1. 滚环核酸扩增( rolling circle amolification，RCA )

2.环介导等温扩增( loop-mediated isothermal amplification，LAMP)

3.链替代扩增

4.依赖核酸序列扩增( nucleicacid sequence based amplification ，NASBA)

5.解链酶扩增( helix dependent amplification， HAD)

TwistDx试剂盒

目前常见的检测有核酸检测和检测。前者通过扩增患者样本中的病毒核酸，直接判定病毒的存在与否。而后者则是通过的存在，来间接推断出是否病毒。所以从检测的性质来看，就已不难理解其准确性会大大低于核酸检测。特别对于还没来得及形成的早期者以及刚刚康复的患者而言，检测的结果一般都不太可靠。因此，检测并不能用于诊断新冠，主要用于协助临床诊断。

等温核酸扩增的新进展为人工核酸提供了简化的孵育条件，只需要恒温而不是热循环。单一温度培养降低了设备要求，开辟了突破实验室界限并在资源匮乏环境中进行扩增的新途径。通过减少扩增时间，消除重复的加热和冷却步骤还为低资源实施提供了第二个优势。更快的反应发生不仅因为加热和冷却时间的减少，而且因为多个分子反应可以异步进行，而不是在人工加热和冷却循环中顺序操作。自 1990 年代初以来，大量的等温核酸扩增方法采用了各种反应机制。