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如何提高扩增曲线的可重复性?

A 优化扩增曲线考虑以下因素: 对于低拷贝数模板，不稳定扩增可能是因为达到检测限或者是反应混匀程度不同（未混匀的反应扩增效率不佳）。另外，在低温情况下存贮，重组酶和辅助蛋白在50%甘油情况下形成沉淀,也是可能导致不稳定扩增的原因。所以，20x***反应mix在室温下解冻并震荡涡旋将使其成为液体，不影响其功能,并且有效提高扩增效率。不稳定扩增也可能是因为master mix量不足，在加入体系前，用户必须保证震荡后20x***反应组分均一。

TwistDx试剂盒

自 1983 年出现经典聚合酶链反应 (PCR) 方法以来，核酸扩增已渗透到生命科学的各个领域。 然而，尽管具有基本的影响，但 PCR 已被限制在实验室的范围内，因为它需要一套复杂的热循环系统，其限制了在资源匮乏环境中的外部应用。新的等温扩增策略正在寻求通过在恒温下提供核酸来突破传统的实验室限制。在这些方法中，重组酶聚合酶扩增 (RPA) 是发展快的方法之一，尽管它的开始相对较晚，但是却经历了快速的普及和市场化。

至关重要的是，RPA 的技术增强了实验室外高度可访问和灵敏的核酸扩增，甚至是自我测试。在这里，我们回顾了 RPA 在其个十年发展过程中的无需设备的简单性。我们的综述包括 RPA 技术的关键知识，例如其反应成分、机制、灵敏度和特异性以及的检测方法。该综述还提供了开发 RPA 分析的专有技术，以及有关市售 RPA 反应试剂盒和附件的信息。