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探针序列不与特异性引物识别位点重叠，长度为46-52nt，序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。  探针共有四个修饰位点:距离5’端的235nt的中部位置标记一个dSpacer(四氢，THF)，作为核酸外切酶的识  别位点;THF位点的上游标记一个荧光基团，下游标记一个粹灭基团，两个基团的间距为2-4nt;THF距离3”末端215  nt，并且3’末端标记一个修饰基团，例如胺基、磷酸基团或C3-Spacer.

病原微生物体形体积微小，大多无色半透明状，将其染色后可借助显微镜观察其大小、形态、排列等。直接涂片染色镜检简便快速，对那些具有特殊形态的病原微生物仍然适用，例如、分枝、螺旋体等的早期初步诊断。直接进行图片镜检的方式检查速度较快，能够对于形态特殊的病原体进行直观的检查，不需要特殊的仪器和设备，在基层实验室里仍然是十分重要的病原微生物检测手段。

病原宏基因组测序（mNGS），是针对病原微生物（细菌、真菌、病毒和等）使用的基因测序技术。它的原理就比较简单了。

首先，我们要掌握病毒的基因序列。（中国科学家在发现后5天就鉴定分析出了它的基因组序列，此处应有掌声！）

然后是检测。在实验室里，技术人员利用基因测序仪器，针对样本中提取的病毒RNA或总核酸进行检测。当样本中检测出的病毒基因序列，与已知的基因序列高度同源，就可以确诊。

在古代，人们把大范围暴发的性疾病称为，“医圣”张仲景在其著作《杂病论》中提到：

“建安元年，丙子年，南阳自此连年疾疫，不到十年之间，张仲景宗族两百余口，死者竟达三分之二。”

肉眼一般只能看到直径大于 100 微米（0.1 毫米）的物体，而绝大多数病原体微生物至多是这个尺度的五十分之一，因此古代医生无法鉴别引发的病原体，只能通过“望闻问切”等方法观察患者症状来确定所患的是何种疾病，从而对症。

1670 年，安东尼 · 列文虎克（Antony van Leeuwenhoek）改进了显微镜。基于显微镜技术的微生物学、学等学科相继诞生，并催生了病原检测技术。

19 世纪的德国细菌学家罗伯特 · 科赫（Robert Koch）是病原微生物学的开拓者。他发明了用对细菌进行染色的细菌染色法，以及微生物的固体培养基培养法和悬滴培养法。

科赫提出了的科赫法则: 对于某种性疾病，如果每一个患者体内都能找到同样的微生物，再把这种微生物提取、培养后，接种到健康宿主体内能引起相同的病症，而且被的宿主体内能提取到这种微生物，就说明这种微生物是性疾病的病原体。

在科赫的理论上发展起来的现代病原体检测方法包括涂片染色后显微镜观察和病原体培养检测。这两种方法简便易行，是极为常用的病原体检测方法。